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接種后的菌袋或菌瓶放入培養室內，調控好環境溫度，培養室要求干凈、通氣、干燥，室溫宜控制在20－25℃左右，相對濕度70％左右（視品種而定）。當菌絲長到5－10cm左右即可翻袋檢查，及時淘汰污染袋，調整菌袋位置以利換氣通風，當菌絲長到一半時，再翻袋檢查一次。整個發菌培養階段不需要光照。 發菌培養室內每天采用臭氧氣體對培養室消毒1小時即可。