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猴頭菇要在子實體完全成熟前采收。標準是：子實體大小基本長足，堅實，孢子還未散發，菌刺1-1.5厘米長即可采收。過晚采收，則肉質松、苦味重，不利加工，而且，影響下一批菇的形成。采收時，一手壓住培養料，另一手將子實體輕輕拔下或用小刀割取。
采收后，及時清理料面，輕輕搔一下菌，讓菌絲體復壯。在適宜條件下，過15-20天就會陸續出現二潮菇。一般可采收2-3次。從接種到采收結束大約需3個月．采收后保鮮不可超過12小時，少量可鮮銷，量大可曬干，也可在60℃下烘干，再用雙層塑料袋密封貯藏。